هدف اصلی از سانتریفیوژ در تولید واکسن های غیر فعال
-
شفاف سازی مایع کشت سلولی
ناخالصی هایی مانند بقایای سلولی و اجزای محیط کشت را در محیط کشت حذف کنید تا مایع رویی کشت خالص حاوی آنتی ژن به دست آید. -
جداسازی ویروس یا باکتری
ویروس یا باکتری موجود در مایع رویی کشت را از اجزای محیط کشت جدا کنید تا غلظت آنتی ژن افزایش یابد. -
حذف ناخالصی
برای بهبود خلوص واکسن، ناخالصی هایی مانند پروتئین های سلول میزبان و اسیدهای نوکلئیک موجود در محلول آنتی ژن را حذف کنید. -
اختلاط کمکی
در مرحله بعدی آماده سازی واکسن، آنتی ژن را می توان با ادجوانت مخلوط کرد و با سانتریفیوژ همگن کرد. -
دیسک جدا کننده
ظرفیت پردازش بزرگ، عملیات مداوم، مناسب برای تولید در مقیاس بزرگ، اغلب برای شفاف سازی مایع کشت سلولی و غلظت ویروس استفاده می شود.
فرآیند سانتریفیوژ در تولید واکسن غیر فعال
کشت سلولی: پاتوژن ها را در محیط کشت مناسب کشت کنید تا در مقادیر زیاد تکثیر شوند.
برداشت سلول: سلول ها را با سانتریفیوژ یا فیلتراسیون از محیط کشت جدا کنید.
لیز سلولی: سلول ها را با روش های فیزیکی یا شیمیایی برای آزادسازی آنتی ژن از بین می برد.
شفاف سازی: از یک سانتریفیوژ برای حذف ناخالصی های ذرات بزرگ مانند قطعات سلولی و سلول های لیز نشده استفاده کنید.
غلظت: آنتی ژن ها را با سانتریفیوژ تغلیظ کنید تا محتوای آنها افزایش یابد.
تصفیه: از شرایط و محیط های مختلف سانتریفیوژ برای حذف ناخالصی ها مانند پروتئین ها و اسیدهای نوکلئیک استفاده کنید.
غیرفعال سازی: آنتی ژن ها را از نظر فیزیکی یا شیمیایی غیرفعال می کند.
افزودن کمکی: آنتی ژن های غیرفعال شده را با ادجوانت ها مخلوط کنید تا اثر ایمنی را تقویت کنید.
پر کردن: واکسن آماده شده را در ظرفی پر کنید.
عوامل موثر بر اثر گریز از مرکز
نیروی گریز از مرکز: مقدار نیروی گریز از مرکز به طور مستقیم بر اثر جداسازی تأثیر می گذارد. هر چه سرعت بیشتر باشد، نیروی گریز از مرکز بیشتر است.
زمان سانتریفیوژ کردن: هر چه زمان سانتریفیوژ طولانیتر باشد، اثر جداسازی بهتر است، اما زمان سانتریفیوژ طولانیتر ممکن است باعث داغ شدن یا دناتوره شدن نمونه شود.
دما: دما تأثیر بیشتری بر نمونه های بیولوژیکی دارد و دما باید با توجه به ویژگی های نمونه کنترل شود.
چگالی متوسط: چگالی محیط بر سرعت ته نشینی ذرات تأثیر می گذارد.
مواد لوله سانتریفیوژ: مواد لوله سانتریفیوژ باید مقاومت در برابر خوردگی و زیست سازگاری خوبی داشته باشد.
اقدامات احتیاطی
عملیات آسپتیک: کل فرآیند سانتریفیوژ باید در شرایط استریل انجام شود تا از آلودگی جلوگیری شود.
تعمیر و نگهداری تجهیزات: تجهیزات سانتریفیوژ را به طور منظم تمیز و نگهداری کنید تا از عملکرد پایدار آن اطمینان حاصل کنید.
بهینه سازی فرآیند: فرآیند سانتریفیوژ را با توجه به انواع مختلف واکسن و مقیاس های تولید بهینه کنید.
